B6-hPD1/hTIGIT

品系名称：B6/JGpt-Pdcd1^{em1Cin(hPDCD1)}Tigit ^{em1Cin(hTIGIT)} /Gpt

品系类型：Knock-in

品系编号：T004024

背景：C57BL/6JGpt

品系描述

PD1(programmed death 1)是程序性死亡受体1，属于CD28 超家族成员，是一种免疫球蛋白超家族 I 型跨膜糖蛋白的重要免疫抑制分子。以PD1为靶点的免疫调节对抗肿瘤、抗感染、抗自身免疫性疾病及器官移植排斥反应等均有重要的意义。

TIGIT (T cell immunoglobulin and ITIM domain)是一个Ⅰ型跨膜蛋白，胞外区带有一个免疫球蛋白结构域，胞内含有 ITIM结构域，主要在T-cell和NK-cell表面表达。体外阻断TIGIT后能增强NK和T细胞的活化及脱颗粒水平，并且能增加细胞因子的分泌（如IFN-γ）^[1]；在不同小鼠肿瘤模型中，体内单独注射TIGIT阻断性单克隆抗体，CT26（结肠癌）、4T1（乳腺癌）和B16/F10（黑色素瘤）的增长与转移显著减缓；联合Flt3L治疗后，小鼠基本不形成肿瘤，生存率也显著增加。

默沙东（Merck）及百时美施贵宝公司（BMS）的两款针对PD1靶点的抗体药 Keytruda (Pembrolizumab，MK-3475)及Opdivo (Nivolumab)，均于2014年由FDA批准上市，用于一线肿瘤治疗，有稳健的抗肿瘤作用。目前临床研究中的TIGIT抗体主要是Genentech MTIG7192A，单独或者和PD-1抗体Atezolizumab联用治疗晚期或转移性肿瘤。

集萃药康将已构建完成的B6-hPD1人源化小鼠和B6-hTIGIT人源化小鼠配繁获得纯和B6-hPD1/hTIGIT小鼠，通过验证的B6-hPD1/hTIGIT小鼠将成为评价TIGIT、PD1或两种抗体药物联合给药评价的动物模型。

应用领域

1.TIGIT抑制剂、PD1抑制剂筛选及性能评价，如肿瘤治疗药物或中和性抗体的筛选；

2.毒理学临床前评价；

3.TIGIT靶向药物与PD1药物联合用药的筛选开发；

4.免疫系统相关的研究。

验证数据

1.PD1与TIGIT表达检测

图1 B6-hPD1/hTIGIT小鼠hPD1与hTIGIT表达检测。B6-hPD1/hTIGIT小鼠T细胞表面能成功表达hPD1与hTIGIT，且表达比例与野生型雌鼠中类似。

2.T/B/NK细胞比例检测

图2 B6-hPD1/hTIGIT小鼠T/B/NK细胞比例检测。B6-hPD1/hTIGIT纯合小鼠与野生型小鼠体内的T/B/NK细胞比例基本一致。

3.体内药效实验

在B6-hPD1/hTIGIT小鼠模型皮下接种MC38肿瘤细胞系后测试抗人PD1抗体及抗人TIGIT抗体联用的肿瘤抑制药效

图3 基于B6-hPD1/hTIGIT的体内联合用药试验（与第三方合作验证）。将对数生长期的结肠癌细胞MC38接种至6-8周龄的B6-hPD1/hTIGIT（TIGIT和PD1双人源化纯和小鼠）皮下，待肿瘤生长至平均体积约100mm3时随机分为Vehicle（对照）组，PD1单药组，TIGIT单药组及PD1+TIGIT联用组（n=5），并使用相应的药物进行治疗。每周给药2次，共给药3周。

结果显示：PD1或TIGIT抗体单用时对肿瘤生长有抑制作用。PD1和TIGIT抗体联用时显示出比单用更强的肿瘤抑制药效（图A）。四组小鼠体重变化趋势接近（图B）。

结果证明：B6-hPD1/hTIGIT小鼠是评估人TIGIT抗体和PD1抗体与其它药物联合用的体内药效的理想模型。