BALB/c-hPD1/hTIGIT

品系名称：BALB/cJGpt-Pdcd1^{em1Cin(hPDCD1)}Tigit ^{em1Cin(hTIGIT)}/Gpt

品系类型：Knock-in

品系编号：T004023

背景：BALB/cJGpt

品系描述

PD1(programmed death 1)是程序性死亡受体 1，是免疫球蛋白超家族 I 型跨膜糖蛋白，是一种重要的免疫抑制分子，为 CD28 超家族成员。以 PD1 为靶点的免疫调节对抗肿瘤、抗感染、抗自身免疫性疾病及器官移植排斥反应等均有重要的意义。

TIGIT (T cell immunoglobulin and ITIM domain)， 是一个Ⅰ型跨膜蛋白，胞外区带有一个免疫球蛋白结构域，胞内含有 ITIM 结构域，主要在 T-cell 和 NK-cell 表面表达。体外阻断TIGIT 后能增强 NK 和 T 细胞的活化及脱颗粒水平，并且也能增加细胞因子如 IFN-γ 的分泌^[1]；不同小鼠肿瘤模型中，体内单独注射 TIGIT 阻断性单克隆抗体， CT26 结肠癌、 4T1乳腺癌和 B16/F10 黑色素瘤的增长与转移显著减缓；联合 Flt3L 治疗后，小鼠基本不形成肿瘤，生存率也显著增加。

默沙东（Merck） 及百时美施贵宝公司（BMS）的两款针对 PD-1 靶点的抗体药 Keytruda (Pembrolizumab， MK-3475)及 Opdivo (Nivolumab)，均于 2014 年由 FDA 批准上市，用于一线肿瘤治疗，有稳健的抗肿瘤作用。 目前在临床研究的 TIGIT 抗体主要是 Genentech 的MTIG7192A，单独或者和 PD-1 抗体 Atezolizumab 联用治疗晚期或转移性肿瘤。

我们将已构建完成的 BALB/c-PD1 人源化小鼠和 BALB/c-TIGIT 人源化小鼠配繁获得纯和的BALB/c-hPD1/hTIGIT，通过表型分析验证的 BALB/c-hPD1/hTIGIT 将成为评价 TIGIT、PD1或两种抗体药物联合给药评价的动物模型。

品系策略

图1  PDCD1人源化策略

图2  TIGIT人源化策略

应用领域

1.TIGIT 抑制剂、 PD1 抑制剂筛选及性能评价，如肿瘤治疗药物或中和性抗体的筛选；

2.免疫耐受抑制剂筛选；

3.毒理学临床前评价；

4.TIGIT 靶向药物与 PD1 药物联合用药的筛选开发；

5.免疫系统相关的研究。

验证数据

1.BALB/c-hPD1/hTIGIT表达检测

图3 BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠hPD1表达检测。BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠T细胞表面能成功表达hPD1，且比例与野生型雌鼠表达mPD1的比例类似。

图4 BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠hTIGIT表达检测。BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠T细胞表面能成功表达hTIGIT，且比例与野生型小鼠表达mTIGIT的比例类似。

2.T/B/NK细胞比例检测

图5 BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠T/B/NK细胞比例检测。BALB/c-hPD1/hTIGIT纯合与野生型小鼠体内的T/B/NK细胞比例基本一致。

3.体内药效实验

抗人TIGIT抗体在接种MC38的B6-hPD1/hTIGIT小鼠模型与接种CT26的BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠模型上药效对比试验

图6 BALB/c-hPD1/hTIGIT与B6-hPD1/hTIGIT的体内药效对比试验（Tiragolumab analogue）。将对数生长期的结肠癌细胞CT26与MC38分别对应接种至6周龄 BALB/c-hPD1/hTIGIT与B6-hPD1/hTIGIT雌鼠皮下。待肿瘤生长至平均体积约100mm3时分为4组（BALB/c-hPD1/hTIGIT对照组、BALB/c-hPD1/hTIGIT TIGIT抗体组和B6-hPD1/hTIGIT对照组、B6-hPD1/hTIGIT TIGIT抗体组，每组6只），使用相应抗体分别给药。每周给药2次，共给药6次，测定肿瘤体积（图A：BALB/c-hPD1/hTIGIT；图B：B6-hPD1/hTIGIT）。

结果显示：BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠接种CT26肿瘤后，使用抗人TIGIT抗体治疗，显示出良好的抗肿瘤效果（TGI=79.0%）；而B6-hPD1/hTIGIT小鼠接种MC38肿瘤后，使用抗人TIGIT抗体治疗，未见肿瘤抑制效果。

结果证明：与接种MC38细胞的B6-hPD1/hTIGIT小鼠模型相比，抗人TIGIT抗体在接种CT26细胞的BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠模型体内药效更显著，BALB/c-hPD1/hTIGIT小鼠模型是评估抗人TIGIT药效的理想模型。