条件基因敲除小鼠
原理 条件性基因敲除主要是通过染色体位点特异性重组酶系统Cre-LoxP、 FLP-Frt和Dre-Rox来实现的。其中最为常用的是Cre-LoxP系统,在待剔除的一段目的DNA序列的两端各放置一个LoxP序列,得到Flox(Flanked by loxP)小鼠。将Flox小鼠与特异性表达Cre的小鼠交配,即可获得具有组织或细胞特异性剔除目的基因的小鼠。这样的Flox小鼠避免了全剔除小鼠可能出现的胚胎致死,并且与不同的Cre小鼠组合,可以使目的基因的表达或缺失发生在实验动物发育的任一阶段或组织器官。此外,若与控制Cre表达的其他诱导系统相结合,还可以对某一基因同时实现时空两方面的调控,应用最为广泛的是Cre/ERT系统。
ES细胞同源重组技术
原理 构建在待剔除的目的DNA序列的两端各有一个LoxP序列的打靶载体,转入ES细胞,通过同源重组获得Loxp重组到基因组指定位置的ES细胞,经囊胚注射、嵌合鼠繁殖,最终获得Flox杂合子小鼠。
服务周期 7-15个月
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