基因敲除敲进模式小鼠定制
基因敲入及基因敲入小鼠
基因敲入(Knockin)是根据实验要求,在目的基因位置引进特定的突变或外源基因。比如在目的基因上引入点突变(模拟人类遗传疾病模型);或将报告基因(如EGFP,mRFP,mCherry,mYFP,Thy1.1或LacZ等)通过同源重组的方式引入目的基因的特定位点,从而可以通过报告基因的表达跟踪目标基因的表达。也可以用报告基因取代小鼠本身的基因,使敲除/敲进同时发生。
服务流程
A. 打靶载体构建:(1-2个月)
包括:基因结构分析、筛选策略设计、探针设计/构建和证实、打靶载体构建(体内重组工程)、核实(同源臂、Neo原件盒、报告基因)、制备电转用DNA;Southern杂交探针设计和优化。
B. ES细胞培养和电转(2-3周)
ES细胞的培养和将打靶载体电转进ES细胞。
C. 阳性克隆的分离和筛选(3-5周)
通过PCR和Southern杂交对抗生素抗性ES细胞和阳性ES细胞的筛选;
对阳性ES细胞进行核型分析;
D. 阳性ES细胞扩大培养和显微注射(2-3个月)
将核型正确的阳性ES细胞显微注射/转移到囊胚中,将囊胚植入代孕母鼠,嵌合体小鼠的出生
E. 嵌合体小鼠与野生型C57BL/6小鼠交配得到F1代小鼠,通过基因型检测确认得到杂合子(2-3 月) 。
F. 小鼠运输。
需要您提供的信息
您只需告诉我们基因名字和您的特殊要求。如果您没有相关的经验,我们会免费为您提供咨询,根据您的需求为您提供最佳的设计方案。
我们给您的终产品
不少于两只的F1杂合子小鼠以及相关实验数据。我们会提供给您相关的检测方法和最终检测报告,您也可以自己进行核实检测,也可以在我们的帮助之下完成。
服务说明
在您的课题进行过程中,我们会每两个周为您发送一次课题进展汇报,内容包括课题进展的每一步结果(包括电泳图、PCR结果、酶切结果和杂交结果等),让您清楚的了解自己课题的进展情况,就如同自己的学生在做lab meeting 一样。
相关技术资料
运费说明
一、 一次运输: 1. 正常情况下,我司安排运输不少于2只(包括2只)活体模式动物,若客户要求增加运输数量(数量足够情况下),我公司只留下1-2只活体作为备份,不再做二次运输; 2. 活体动物完成运输1个月后,客户经理联系客户确认动物保种情况,若客户保种成功,我们即处死备份活体动物; 3. 活体动物完成运输1个月后,若客户要求继续保种或未做回复者,即日起开始计算代养费用。 二、 二次运输: 1. 若一次运输客户顺利拿到不少于2只(包括2只)活体动物时,客户要求二次运输者,所产生费用由客户承担,同时我司将剩余活体全部运输,不做活体备份;如需我司继续保留活体备份,即日起开始计算代养费用。 2. 若一次运输客户拿到少于2只活体动物时,客户要求二次运输者,所产生费用由我司承担。