CRISPR基因编辑技术是通过设计与构建针对靶基因DNA序列（～22bp）互补的引导RNA，并与Cas9核酸酶一起直接导入实验动物的生殖细胞，因特异性引导RNA的定位，Cas9核酸酶对靶DNA进行特异性切割，造成双链靶DNA 的断裂，诱发内源性DNA的非同源末端修复机制（non-homologous end joining，NHEJ），而修复过程则会引起DNA核苷酸的缺失或增加等错配，导致基因移码突变，实现基因敲除（Knockout, KO）模式动物建立的目的。如果需要对目的基因进行特定修饰（点突变，基因插入等），则要在CRISPR基因敲除构建策略的基础上，添加计划插入修饰的DNA片段（donor DNA），达到对特定基因插入和替换遗传修饰。