中国医学科学院生物医学研究所刘红旗博士在会上作了题为“树鼩呼肠孤病毒的分离和鉴定”的报告。他在会上对2株不同基因型树鼩呼肠孤病毒的分离和鉴定实验过程作了详细的介绍,实验采用树鼩腹泻粪便样本分别接种Vero、LLC-MK2和KMB17细胞,经连续传代,观察记录细胞病变,并对培养上清进行透射电镜检查、病毒RNA-PAGE电泳分析、轮状病毒鉴别筛查、S1全长基因片段扩增和生物信息学分析。结果发现树鼩腹泻粪便样品在KMB17、Vero 和LLC-MK2细胞上经连续3代次传代后,均能产生细胞病变。经电镜检查、病毒RNA-PAGE电泳分析和轮状病毒鉴别筛查,推测其为呼肠孤病毒。病毒基因组全长S1基因扩增、序列测定和分析结果表明,KMB17培养上清中获得的病毒与I型原型株T1L同源性最高,核苷酸和氨基酸同源性分别为85%和90%,因此该病毒定义为呼肠孤病毒I型。而LLC-MK2和Vero细胞上清中的病毒S1基因与III型原型株T3D核苷酸和氨基酸同源性分别为85%和92 %,因此为呼肠孤病毒III型。通过3种细胞和S1基因片段特异性引物从同一粪便样品中分离和鉴定了2个不同基因型呼肠孤病毒,对今后树鼩和其他宿主呼肠孤病毒的分离鉴定有一定的指导意义。
报告人简介
刘红旗,中国医学科学院和北京协和医学院医学生物学研究所研究员、硕士研究生导师、国家昆明高等级生物安全灵长类动物实验中心感染和免疫实验室负责人。主要从事炎症、感染和免疫方面的工作,目前的主要研究方向:树鼩免疫学;自身免疫、炎症和感染中的分子免疫致病机制;抗炎症药物的作用机理研究;诺如病毒及载体疫苗。共发表论文38篇,其中在Journal of Immunology、PNAS、Oncogene和JBC等杂志发表SCI论文14篇。曾参与4项美国国立卫生院RO1项目,主持国家自然基金面上项目1项目、云南省应用基础研究计划项目1项和中国医学科学院医学生物学研究所人才引进项目和重点项目各1项。先后获江苏省科技进步一等奖, 江苏省优秀博士论文。