1.造模材料 动物:健康杂种犬,体重15~17kg。雌雄不限;药物:牛磺胆酸钠。
2.造模方法 实验组和对照组动物均采用3%戊巴比妥1ml/kg静脉麻醉。胃前壁、胆囊和膀胱造瘘。幽门及胆总管下端4号线结扎。胰腺呈粉红色扁平长带状,紧贴十二指肠肠壁。在胰腺根部与十二指肠连接处的对侧肠壁。纵行切开即可见一大小约1.0~1.5mm的脐样凹陷,为主乳头(主胰管开口于此),置入直径1.0mm的特种聚氨酯导管材料1~1.5cm,并在十二指肠壁行荷包缝合固定。主乳头上方约1.5~3cm处找到副乳头(胆总管和副胰管开口于此),行副胰管插管同前,并行十二指肠插管。近屈氏韧带处10号线结扎,并于其下30cm行空肠造瘘。每天补液量在1800~2500ml,术后犬生命体征平稳。
重症急性胰腺炎诱导:实验组动物于手术第4天在无菌条件下经微泵向主胰管内注入5%牛磺胆酸钠溶液1ml/kg。
3.造模原理 牛磺胆酸钠可破坏细胞壁的脂质双分子层,溶解细胞。
4.造模后的变化 实验组和对照组犬手术当天精神萎靡,呼吸浅快,术后1天好转,生命体征平稳。实验组犬在胰腺炎诱导过程中。动物烦躁,四肢抽动。胰腺炎诱导后,呼吸、心率明显加快,体温升高1~2℃,动物偶有烦躁,伴呕吐。对照组一般情况较好,体征平稳。
术前及胰腺炎诱导前1天,血淀粉酶在500~800U/I左右。其肝肾功能、电解质水平基本正常。建模后血淀粉酶明显升高,波动在2500~6300U/I,且逐渐升高,36~48h达到高峰,后逐渐下降。建模后出现明显的低血钙、低清蛋白血症,并有肝脏功能[丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)升高]和肾脏功能(尿素氮、肌酐升高)的损害。胰液中淀粉酶在6~12万U/I,48~72h达到高峰。胰腺炎诱导后24h腹部增强CT显示,胰腺实质及周围炎症改变,胰周及肾周筋膜渗出显著,可见部分胰腺和脂肪坏死。对照组无明显生化和影像学改变。
剖腹可见大网膜、腹膜及肠壁多处皂化、粘连、脂肪坏死,伴有不同程度的血性腹水,肠壁变薄、水肿,整个胰腺大部呈出血性或凝固性坏死。组织病理观察,在光镜下可见胰腺大部坏死,腺体结构消失,大量炎性细胞浸润伴有出血,血管极度充血。对照组无明显组织学改变。
5.注意事项 手术器械严格消毒,防止手术感染,手术创伤应尽可能小,严格无菌操作。