贵州小型猪为近年来开发的新型医学研究实验动物。本实验目的在于观察小型猪不同年龄组心脏的酶组织化学。即将形态学和酶活性结合起来观察酶在心肌纤维的分布及其酶活性的高低；并比较不同年龄段的酶活性，以获得更丰富的资料，为该新型实验动物用于医学研究提供实用的、科学依据。

1.方法与材料

(1)实验动物  由贵阳中医学院实验动物研究所提供小型猪。根据不同年龄段分为三个实验组：成年猪组、幼年猪组、乳猪组。每组雌雄小猪各3只，共18只。

(2)酶组织化学  动物处死后，立即取材：左心室约3mm，进入液氮骤冷。在恒冷切片机上切成8切片。染色的酶种类和方法见表2-12所示。酶活性强弱以半定量法计：可疑阳性(±)，弱阳性(＋)，阳性(＋＋)，强阳性(＋＋＋)，极强阳性(＋＋＋＋)。

2.结果  心脏的酶染色观察有心肌的横切面和纵切面两种情况。小型猪心脏酶组织化学详见表2-13所示，心肌纤维大多数的脱氢酶活性较高，如：SDH、LDH、NADH、MDH等。水解酶活性很低，为阴性。不同年龄组之间，心肌纤维的大小差别较大。部分酶类分布与年龄有关，如成年组的SDH、 MDH、NADH、ACP和NADPH活性较乳猪组要高，乳猪组酶活性较高的酶有G-6-PD、CK和 CC0。只有LDH和GPD在不同年龄组差别不太明显。

3.讨论  心脏是机体最重要的器官之一。心肌纤维的酶非常丰富。因酶组织化学方法所限，我们选择观察的酶主要分为两大类：脱氢酶和水解酶。前者主要是有氧代谢酶和糖酵解酶。有氧代谢酶的代表酶主要包括SDH、MDH、NADH和CCO，糖酵解酶的代表酶有LDH、GPDH，另外还有反映能量储存和利用的CK，与氨基酸代谢有关的GDH，有戊糖旁路的第一个酶G-6-PD，可能与微粒体有关的NADPH，唯一的水解酶是溶酶体酶ACP。

心脏酶组织化学有其本身的特点，心脏组织结构较单一，主要观察心肌纤维的酶分布，心肌纤维的酶活性以脱氢酶的活性较高，如SDH、NADH、LDH、GDH等。水解酶的阳性率很低，从小型猪不同年龄组的心脏酶分布来看，随年龄增加酶活性上升的酶有：SDH、MDH、NADH、NADPH和 ACP。与年龄增长无关的酶有：LDH、NAE。成年后酶活性下降的有：CK、G-6-PD、GDH、CCO。这些酶活性的变化与不同年龄阶段的生理功能的发育有密切关系。在早期发育中，心肌纤维的功能以糖酵解较有氧代谢重要。而成年后则相反，主要以有氧代谢为主。因此实验结果中有关有氧代谢的酶成年组较幼年猪组和乳猪组要高。但CCO例外，CCO是氧化磷酸化的一个重要酶，无论是有氧代谢和无氧代谢，都是必需的，乳猪的代谢功能非常活跃，所以CK和G-6-PD活性很高。一般而言，正在生长和增殖的细胞中，需有大量的能量和核酸，而CK催化ATP释放高能磷酸键，提供心肌纤维能量。G-6-PD与核糖生成有关。此外，乳猪组的GDH活性高，反映物质的中间代谢活跃。NADPH在成年猪组酶活性强，也与其阶段微粒体功能发育成熟有关。同样，溶酶体酶ACP是心肌纤维内脂质残余体，于成年后才会出现。

贵州小型猪的心肌细胞酶活性与人体比较，酶在心肌纤维的分布和活性高低基本相同，凡是能量代谢相关的酶，无论是有氧代谢或无氧代谢的酶类均有很强的活性，如SDH、MDH、NADH、LDH、 CCO等，以半定量记录，均在“＋＋＋”以上。另外一个特点是，在酶组织化学方法中，心肌大多水解酶活性极低，或者全为阴性。总之，实验结果提示，贵州小型猪与人体的心脏酶组织化学有高度一致性，种间差异极小，因而表明，在进行有关心脏疾病的研究和某些药理学、毒理学研究中，贵州小型猪是一种最佳的实验动物。

4.结论  经研究，贵州小型猪不同年龄组心脏的酶组织化学，成年组有氧代谢酶活性，如SDH、 MDH、NADH较乳猪组高，而乳猪组的CK和G-6-PD)较高。贵州小型猪与人体的心脏酶组织化学相比有高度一致性，可作为有关心脏疾病和某些药理学、毒理学研究的最佳实验动物。