目的 研究转录因子阴阳 1(Yin-Yang1,YY1)上调程序性死亡分子配体1(PD-L1)表达促进胆囊癌免疫逃逸的作用。

方法 采用免疫组化法检测胆囊癌组织、癌旁组织、正常胆囊组织中YY1蛋白表达水平,体外培养正常人胆囊上皮细胞系 HGBEC 和人胆囊癌细胞系 GBC-SD、SGC-996、IH-GB1,实时荧光定量 PCR( qRT-PCR)法 测定各细胞中 YY1 水平;YY1 siRNA-1675 转染 GBC-SD 细胞。 实验分为 BC 组、YY1 siRNA NC组、YY1 siRNA-1675 组。 流式细胞仪测定PD-L1、CD69、CD25水平及人T淋巴细胞凋亡率;酶联免疫吸附法(ELISA)测定上清液中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10( IL-10)、干扰素γ( IFN-γ)水平;PROMO网站预测YY1的潜在靶基因,行双荧光素酶报告实验验证。

结果 与正常组织相比,癌旁组织、胆囊癌组织中 YY1 阳性表达率显著升高(P<0.05),与癌旁组织相比,胆囊癌组织中 YY1 蛋白阳性表达率显著升高(P<0.05);与人胆囊上皮 HGBEC 细胞相比,人胆囊癌IH-GB1、SGC-996、GBC-SD细胞中 YY1 水平显著升高(P<0.05),其中GBC-SD细胞中 YY1 水平最高,因此后续实验以 GBC-SD 细胞进行。 与 BC 组、YY1 siRNA-NC组相比,YY1 siRNA-1675组 IL-2、IL- 4、IL-10、IFN-γ、CD69、CD25水平显著升高(P<0. 05),YY1、PD-L1水平和人T淋巴细胞凋亡率明显降低(P<0.05); PROMO网站预测表明,PD-L1是YY1的靶基因,双荧光素酶报告实验证明PD-L1是YY1的作用靶点。

结论 下调YY1水平可靶向抑制PD-L1表达,可能通过此机制抑制胆囊癌免疫逃逸。

阅读原文：转录因子YY1上调PD-L1表达促进胆囊癌免疫逃逸的作用研究.pdf