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分化抑制因子1在乙型肝炎病毒复制、肝癌细胞增殖和凋亡中的作用及机制研究
目的 探讨分化抑制因子1(inhibitorofdifferentiation1,Id1)在乙型肝炎病毒复制、肝癌细胞增殖和凋亡中的作用及机制。
方法 使用RNA干扰技术将HepG2.2.15肝癌细胞株的Id1基因沉默,作为siRNA-Id1 组,设计无关序列作为 siRNA-Control 组,使用 Pifithrin-α 抑制 siRNA-Id1 细胞中 p53 的表达,作为 siRNA-Id1+ Pifithrin-α组,将HepG2.2.15肝癌细胞作为Control组, 依次使用qRT-PCR、Westernblot、ELISA、MTT、流式细胞术检测乙型肝炎病毒的复制、细胞的增殖和凋亡。
结果 siRNA-Id1 组细胞中 Id1mRNA 和蛋白的表达量低于 siRNA-Control组(P<0.05), 与siRNA-Control组相比较,siRNA-Id1组细胞中HBxmRNA和蛋白的表达量降低(P< 0.05),上清液中HBsAg和HBeAg的含量降低(P<0.05),细胞增殖缓慢(P<0.05),早期细胞凋亡比例和晚期细胞凋亡比例升高(P<0.05),细胞中Bax和Cleavedcaspase-3蛋白的表达量升高(P<0.05),而BcL-2蛋白的表达量降低(P<0.05), Pifithrin-α可不同程度的抑制Id1基因沉默后的上述生物学效应(P<0.05)。
结论 RNA干扰Id1可以降低乙型肝炎病毒的复制,抑制肝癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与p53的过表达有关。
阅读原文:分化抑制因子1在乙型肝炎病毒复制、肝癌细胞增殖和凋亡中的作用及机制研究.pdf
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