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心肌细胞迟后除极和触发心律失常药理模型
2017年01月12日
来源:《人类疾病动物模型复制方法学》
作者:周光兴
责任编辑:yjcadmin
(1)复制方法 体重为200~300g豚鼠,用钝器击昏,迅速取出心脏,在富含氧的Tris一台氏液(NaCl 137mmol/L, KCl 5.4mmol/L,CaCl22.3mmol/L,MgCl21.05mmol/L, NaHCO31.2mmol/L。Glucose 11.2 mmol/L,Tris5.0mmol/L,pH 7.4)培养皿中分离左心室乳头肌,将其固定于特制的玻璃浴槽中,以Tris—台氏液灌流,流速4ml/min,温度维持在37℃,通以95%O2+5%CO2。稳定20min后,予以方波刺激,刺激基础周长为800ms,波宽2ms,强度为2倍阈强度,用玻璃微电极记录其跨膜电位,微电极以A9—AgCL细丝线连接至微电极放大器放大后,一路导入双线示波器观察,另一路导入微机记录系统进行记录。先记录标本以正常Tris一台氏液灌流的对照跨膜动作电位波形,再用含有0.1~O.5μmol/L哇巴因或0.5~2μmol/L异丙肾上腺素或≥10mmol/L Ca2+的灌流液灌流,观察加入上述药物1.5h内动作电位波型、DAD及触发性心律失常(室性早搏、二联律、三联律、室性心动过速等)的出现。
(2)模型特点 强心苷等药物可致细胞内Ca2+过多而诱发Na+短暂性内流引起迟后去极化(DAD)甚至触发性心律失常,本法利用标准微电极技术记录豚鼠乳头肌动作电位,并结合哇巴因或异丙肾上腺素观察药物对DAD及触发性心律失常的影响。为研究心律失常电生理基础的离体实验模型。
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