坏死性结肠炎(necrotising enterocolitis，NEC)是最常见的威胁新生儿生命的胃肠道急性病，使得5％的新生儿住进了重症监护室，并导致20％～40％的死亡率。NEC的发病机制并不清楚，目前公认的主要致病因素包括：肠道发育不成熟、肠道营养吸收不良、细菌定植紊乱，还有研究者认为肠道的血流动力学和血管变化也可能是原因之一。最令人困扰的是到目前为止NEC没有特异性的治疗方法，尽管新生儿重症监护和生存环境整体上都得到改善，但是前面提到的数据并没有下降。NEC还常伴发于长期肠外营养、多种类型的手术以及短肠综台征。这些数据让人惊讶，引起了患者、医者与研究者的广泛重视。

1．研究模型实例一：缺氧和(或)内毒素诱导的NEC

(1)实验设汁：动物被分为4组，分别记录三次时间长度为45分钟的自由呼吸数据，三组数据平稳之后再开始实验。第一组(对强组)：自发完全自主呼吸房间空气，在实验开始时通过中心静脉推注1ml／kg猪血清白蛋白。第二组(缺氧组)：从实验开始时动物呼吸房间空气45分钟，然后呼吸45分钟含10％氧气的空气，之后继续呼吸45分钟房间空气。第三组(内毒素组)：自发完全自主呼吸房间空气，在实验一开始时股静脉推注2ml／kg脂多糖。第

四组(缺氧／内毒素组)：按照第二组的步骤造成缺氧，同时在实验开始时，按照第三组的步骤给予脂多糖。

(2)手术方法：27头足月的新生堪培拉白猪，平均年龄足3日龄(2～6日龄)，平均体重是1997g(1465～2270g)，在实验开始之前的2～3小时从窝里取出。氧气中混合3％～5％的异氟烷按照3.5L／min的速度输入一个麻醉盒，再通给面罩。诱导麻醉之后，气管插管给予含2.5％异氟烷的氧气维持麻醉，然后颈静脉插入导管，中断吸入麻醉，静脉给予安泰酮(Saffan)，用生理盐水稀释，最初按4～8mg／kg剂量给予，在手术期间按4mg／kg推注，之后以同样浓度按16～24mg／(kg·h)持续静脉输注，手术结束后实验期间按7～12mg／(kg·h)静脉输注。安泰酮的作用时间短，只有持续给药才能有效地止痛，它对心血管系统和呼吸系统的影响微弱。一旦麻醉开始，监测肛温，使用加热垫和加热灯使其维持体温在38.5～39.5℃。电子肺量计通过气管捅管连续记录呼吸频率和潮气量。股动脉捅管测量搏动的动脉压(arterial blood pressure，ABP)，从而可推算出心率。股静脉插管后，进而插入下腔静脉，用于中央静脉给药。

(3)腹部观察：从腹正中作切口探查腹部，小心剥离肠系膜上的一条动脉分支，将电磁流量探头放置在肠系膜动脉周围，以便持续记录肠系膜血流量(mesenteric blood flow，MBF)。短暂的夹住血管来归零流量计，尽量将肠道处理带来的伤害控制到最小，暴露的肠道用温生理盐水浸泡过的纱布覆盖。一旦监测的血流量稳定，将肠道放回腹腔并进行缝合，腹部闭合后稳定1小时。肠系膜血管电导可以通过MBF／ABP的比值进行实时计算。

(4)生理监测结果：对照组的生理参数未见明显变化，缺氧组的血压在整个实验过程中都没有变化，内毒素组的血压在45分钟和90分钟有明显减低，但是在实验的末期又回到了基线。缺氧／内毒素组的动脉压在实验的末期有轻微的下降。

1)肠系膜血流(MBF)：缺氧组和内毒素组的MBF没有明显的变化，而在缺氧／内毒素组MBF有平稳地下降，在90分钟和135分钟时下降的尤为明显。

2)动脉血的氧分压、二氧化碳分压和PH：对照组中都正常，在其他三个实验组都经历了缺氧，均有相似的低氧血症，在90分钟时氧分压从68mmHg降到40mmHg，在恢复呼吸之后，氧分压回到了68mmHg，在整个实验过程中各缺氧组之间未见明显差异。各个实验组的二氧化碳分压比较稳定，在任何时候都未见明显差异。各组的m液pH基础值都接近7.4，但在对照组和缺氧组的实验后期有升高的趋势。在内毒素组pH没有显著地降低，但是在缺氧／内毒素组的平均pH有所下降，在90分钟时显著低于对照组，并在实验的后期逐渐恢复。

3)血液学分析：各个处理组的血红白蛋白没有明显变化；给予内毒素的两组白细胞(white blood cell，WBC)有显著下降，而缺血组中没有明显变化；各个处理组中血小板的降幅不大，但是在统计学上有显著差异，在实验的所有阶段均小于350×10⁹个／L。

4)病理分析：肉眼检查和显微检查下可以看到对照组和缺氧组无异常变化，肉眼可以看内毒素组、缺氧／内毒素组的小肠和大肠的浆膜表面有同样的灰暗变色，散在的出血性病变，长度在0.1～10cm，大多数分布在回肠和盲肠。缺氧／内毒素组比内毒素组的出血性坏死分布更广。

缺氧组仅引起血流动力学变化，肉眼和显微镜下均未见肠组织病理学的变化，内毒素组引起轻微的低血压，MBF降低，肉眼和显微镜观察均见肠道坏死。但是，缺氧／内毒素组明显加重了血液学改变，更大范围的坏死，可见并发的代谢性酸中毒，这组的表现与新生儿发生NEC的早期病理过程非常的相似。之前报道，猪的NEC模型只能通过重大创伤法制作，如结扎或阻断肠系膜动脉、深度窒息与腔内注射酸化的络蛋白等，这些实验损伤方式都不能反映临床的情况，然而这个模型展现了NEC样的坏死，与临床病变更相似。如果想制作不同程度的NEC坏死样模型，研究显示血小板活化因子(PAF)是促使NEC发生的相关因子，所以研究者认为可以使用PAF受体拈抗剂WEB2170来改善缺血和内毒素引起的NEC症状。

2．研究模型实例二：缺血引起NEC的改良模型  大多数的NEC动物模型都是通过造成缺血伤害而引起全部肠道坏死，这与解剖学上的NEC偏好发生于回肠远端和结肠是不一致的，可见这种建模方式并不能很好的模拟真实的情况。下面这个模型更有针对性，更好地体现了NEC的这个偏好性。

(1)实验设计：新生约克夏猪8头，分为两组，第一组小于3日龄，第二组为2周龄。

(2)手术方法：肌肉注射0.1mg／kg咪达唑仑麻醉，1％～2.5％氟烷与97.5％～99％氧气混合经气管输入维持麻醉。实行中线剖腹术，在不引起局部缺血的情况下，在回肠的近端结扎，距离回肓瓣40cm，用26号针头远侧透壁注射0.9％的温生理盐水冲洗。间隔10cm连续结扎，做出6个肠袢，4个在回肠，1个在盲肠，1个在结肠，用24号针头在肠袢注射0.9％无菌生理盐水或实验溶液，包含10mg／ml的牛酪蛋白和50mg／ml的葡萄糖酸钙，用丙酸将pH调至4.0。在注射时，注意避免肠袢过度膨胀，消除因缺血引起的损伤，然后关闭缝合腹腔。实验期间，所有的动物按5ml／(kg·h)静脉注射0.9％的生理盐水，使用电热毯或加热灯使体温保持在37℃左右。3小时后，肉眼观察肠段的损伤情况，并在心内注射戊巴比妥钠(65mg／ml)实行安乐死，收集相应的组织。用生理盐水清洗肠腔，福尔马林固定，冰冻切片后HE染色。显微镜观察可见区域性坏死、黏膜下层出血、炎性细胞浸润与淋巴结肿胀。这个模型中小于3日龄的猪肠损伤达到肌层，损伤分级为3.25左右，2周龄的猪肠道伤及黏膜，黏膜下层结构被破坏，少量肌肉层的损伤评分在2.43左右。由此可见，我们可以根据需要选择增加／减少酪蛋白的量，或者选择年龄偏大的猪来制备不同要求的NEC模型。这个模型也可用于清醒状态的研究。由于该动物模型具有简单性、可重复性、一致性、适用性，以及组织学观察的相似性，因此，猪NEC模型常用于药物治疗和病因学的研究。