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实验方法

小型猪耳科比较医学

2016年10月10日 浏览量: 评论(0) 来源:《小型猪医学研究模型的建立与应用》 作者:陈华主编 责任编辑:yjcadmin
摘要:在耳科研究领域,包括听觉、前庭觉电生理研究、中耳植入、耳蜗植入、干细胞治疗以及耳聋病的基础研究方面,都需要大量的动物实验。

在耳科研究领域,包括听觉、前庭觉电生理研究、中耳植入、耳蜗植入、干细胞治疗以及耳聋病的基础研究方面,都需要大量的动物实验。新西兰兔、豚鼠、沙鼠等小型动物都是传统的耳科实验模型动物,但其听觉系统普遍较小,解剖与功能方面与人类也存在明显差异。小型猪与人类的基因同源性高、耳部解剖与人相近,中耳大小与人耳类似,而且小型猪内耳形态学及听力发育和人类一样,都是在胚胎后期完成,并且在出生时耳蜗已经发育成熟。因此,小型猪作为耳科研究的模型动物比其他常用实验动物具有更大的优势,其在耳科领域的应用也日趋广泛。

在耳蜗发育方面,哺乳动物胚胎发育早期是内耳感觉前体细胞发育及定向分化的关键时期。不同品种的小型猪耳部的发育不尽相同,但根据现有的资料来看,差异并不十分明显。比如贵州小型猪的耳蜗胚胎发育过程大致如下:从胚胎21天听泡(内耳始基)开始到胚胎91天耳蜗发育至成熟的外观,共经历70天,其中,胚胎49~56天耳蜗的形态变化较大。在胚胎49天蜗管所占耳蜗的体积比例较小,耳蜗中填充着组织。胚胎56天后耳蜗的顶圈、中圈、底圈中已有前庭膜的存在,除顶圈中的鼓阶未形成完全外,前庭阶、中阶及鼓阶已形成,螺旋器的雏形也已形成,而且血管纹已初具形态。在胚胎91天耳蜗的螺旋器、血管纹达到成熟的外观。人耳蜗中的感觉毛细胞、盖膜、前庭膜在胚胎24周时即完全完成了形态学上的发育。因此,小型猪胚胎91天的发育水平相当于人类耳蜗胚胎发育的24周的水平。哺乳动物的血管纹的发育遵循了从底圈到顶圈的发育过程。血管纹发育的进度与内耳的其他区域的发育进度相关,螺旋器的感觉上皮依赖于血管纹,人类在胚胎20周时血管纹就有了成熟的外观,在胚胎22周血管纹三种典型的边缘细胞、中间细胞和基底细胞都可以观察到。小型猪到胚胎91天从底圈到顶圈血管纹已达到成熟的外观。小型猪的盖膜在胚胎56天的底圈中即可观察到,这与人类的盖膜发育也是一致的,因为人类的盖膜是在胚胎第10周就可以观察到。小型猪作为出生后就具有听力的哺乳动物,其耳蜗的发育在胚胎时期已经达到成熟状态,这与人类耳蜗发育及功能的建立具有相似性。

在耳部解剖方面,小型猪与人类颞骨的相似性使其可以在耳科研究领域得到广泛应用。小型猪颞骨外耳道及乳突的位置,显然与人类明显不同(图4-1),但其中耳与人类类似,可用于耳科研究(图4-2)。小型猪六个鼓室中有四个与人类类似,听骨链、肌肉和神经也类似于人类。另外,通过采用人类中耳机械力学的研究方法,对小型猪中耳进行数据测量分析,结果显示:小型猪中耳结构与人类相近(表4-1)。小型猪颞骨解剖结构与人类颞骨非常相似,是小型猪在耳科领域内广泛应用的基础。以小型猪作为模型动物,可以开展包括外耳、中耳、内耳甚至耳神经-侧颅底疾病在内的实验研究。

 

 图4-1  小型猪及其颞骨、鼓膜

A.小型猪;B.颞骨横向视图;C.颞骨的内侧图;D.颞骨岩部横向视图;E.颞骨岩部的内侧图;F.打开的耳道中看到的鼓膜;G.猪头颅冠状CT扫描显示:精确定位向上和向后的很长的外耳道;H.猪头颅冠状CT扫描显示:乳突气房细胞系统(直箭头头部),内侧为颞下颌关节,毗邻于鼓室腔。SB:鳞状骨,M:乳突,EEC:外耳道,PB:颞骨岩部,BB:Bill’s bar,TB:transverse bar,C:耳蜗,RW:圆窗,OW:卵圆窗,M:乳突,SC:半规管,CP:锤骨,MO:蜗轴,HM:锤骨柄,TM:鼓膜

 

图4-2  贵州小型猪中耳视图

A.磨除乳突后的右侧中耳;B.鼓室内容物;C.镫骨及镫骨头由面神经包绕,提供尾部的定音鼓和弦;D.圆窗及鼓膜张肌纤维。MS:乳突窦;C:耳蜗;CA:颈内动脉;LSC:外半规管;MH:锤骨头;FN:面神经;FC:前下肢;PC:后下肢;I:砧骨;ISJ:踮镫关节;JN:雅各布森神经;HM:锤骨柄;CT:鼓索;RW:圆窗;SH:镫骨头;TT:鼓膜张肌

表4-1  小型猪、家猪、人类耳部解剖数据比较

 

 

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