浙江省实验动物监督检测站
一、检测实验室能力建设
1、计量认证和/或实验室认可的检测范围
检测的动物种类:大鼠,小鼠,兔子,豚鼠,地鼠、犬、猴、沙鼠、SPF鸡;专业领域:细菌22项、病毒24项、寄生虫10、环境13项、生物安全柜8项,SPF鸡微生物19项(归为一大项)。
2012,2015年共二次评审,扩项为SPF鸡19项,生物安全柜8项。
2、实验动物质量和相关支撑条件检测参数(见表1和表2)
表1 实验动物检测参数一览表
检测动物 |
检测参数(个) |
||||||
细菌 |
病毒 |
寄生虫 |
遗传 |
营养 |
病理 |
环境 |
|
小鼠 |
16 |
12 |
8 |
/ |
1 |
/ |
13 |
大鼠 |
16 |
8 |
8 |
/ |
1 |
/ |
13 |
豚鼠 |
15 |
5 |
7 |
/ |
1 |
/ |
13 |
地鼠 |
15 |
5 |
6 |
/ |
1 |
/ |
13 |
兔 |
13 |
4 |
8 |
/ |
1 |
/ |
13 |
犬 |
6 |
4 |
5 |
/ |
1 |
/ |
13 |
猴 |
6 |
5 |
6 |
/ |
1 |
/ |
13 |
长爪沙鼠 |
16 |
12 |
8 |
/ |
1 |
/ |
13 |
小型猪 |
/ |
/ |
/ |
/ |
1 |
/ |
13 |
鱼 |
/ |
/ |
/ |
/ |
1 |
/ |
/ |
…… |
/ |
/ |
/ |
/ |
1 |
/ |
13 |
牛* |
/ |
/ |
/ |
/ |
1 |
/ |
13 |
羊* |
/ |
/ |
/ |
/ |
1 |
/ |
13 |
树鼩* |
/ |
/ |
/ |
/ |
1 |
/ |
13 |
灰仓鼠* |
/ |
/ |
/ |
/ |
1 |
/ |
13 |
猫* |
/ |
/ |
/ |
/ |
1 |
/ |
13 |
…… |
/ |
/ |
/ |
/ |
1 |
/ |
13 |
注:上述检验参数中包括无菌检测的一大项。
表2 检测参数一览表(认可范围之外、实验室已建检测方法)
动物 |
项目 |
检测方法 |
||||
血清 |
培养法 |
PCR |
镜检 |
16S或宏基因组测序法 |
||
兔 |
RHDV |
√ |
√ |
√ |
/ |
|
大鼠 |
泰泽菌 |
√ |
/ |
√ |
√ |
|
各种动物 |
沙门菌 |
|
√ |
√ |
/ |
√ |
3、实验动物质量和相关支撑条件的检测方法
根据省技术监督局的要求,主要以有计量认证的标准为依据进行检测。但随着生物技术及行业的快速发展,许多项目的检测面临着仪器设备的更新,检测方法的更新及相应检测试剂不配套的局面,一味地按老标准检测,显然跟不上形势及社会需要,比如IVC笼具及基因工程动物的检测,至今未出相关的国家标准,但实际工作中对该笼具的检测及基因工程动物检测却有着强力的社会需要,因此进行相关的研究,尽快制定相关标准,是我们行业的当务之急。实验动物质量和相关支撑条件的检测方法见表3。
表3 实验动物质量和相关支撑条件的检测方法一览表
检测项目 |
检测方法 |
|
标准规定方法 |
实验室自建方法(或称非标方法) |
|
细菌 |
GB/T14926 |
PCR法,血清法,培养法,宏基因组测序法 |
病毒 |
GB/T14926 |
PCR法,血清法,培养法、测序法 |
寄生虫 |
GB/T18448 |
PCR法,血清法,培养法、测序法 |
遗传 |
GB/T14923,GB/T14927 |
PCR法,血清法,测序法 |
营养 |
GB 14924 |
/ |
病理 |
/ |
兽医病理与药物病理 |
环境 |
GB14925,GB50447,GB 19489 |
IVC的检测方法 |
生物学特性 |
/ |
/ |
生物安全柜 |
YY0569-2011 |
按医药行业标准进行 |
4、检测实验室能力验证
从2002年以来,本站每年均参加区域性(华东地区相关省市)及全国性实验室间比对及能力验证,涉及的项目包括各类动物的细菌、病毒、寄生虫,环境,采用同源样品分割,同时同地检测,同时报结果的方法,检测能力得到充分的验证,通过人员交流使检验技术与经验得到进一步提高。自2013年起每年都参加中国食品药品检定研究院主办的CNAS能力验证,项目包括细菌和病毒(金葡菌、绿脓菌、沙门菌、大鼠细小、Reo3、RHDV),连续三年获得满意或优秀的验证结果。2010年主办全国性的比对一次,包括自行研究开发的弓形虫、RHDV等新方法及试剂盒的应用比对等。
二、检测实验室工作情况
1、实验动物质量和相关支撑条件的检测情况
1.1实验动物质量检测情况
自2011年以来,每年检测包括大小鼠在内的6个品种(品系多达12个)约500只(条,个)动物,项目包括细菌、病毒、寄生虫,涉及单位包括高校,科研院所,药检系统,养殖公司等,级别包括普通、清洁和SPF,另外有少量无菌级及悉生级动物,检验性质包括监督和委托两大类,具体见表4。
表4 实验动物质量检测情况(2011年-2015年)
时间 |
检测动物 |
||
种类 |
项目 |
数量 |
|
2011 |
大鼠、小鼠、豚鼠、兔、沙鼠、猴、犬 |
细菌、病毒、寄生虫 |
500左右 |
|
遗传、…… |
/ |
|
2012 |
大鼠、小鼠、豚鼠、兔、沙鼠、猴、犬 |
细菌、病毒、寄生虫 |
500左右 |
|
遗传 |
/ |
|
2013 |
大鼠、小鼠、豚鼠、兔、沙鼠、猴、犬 |
细菌、病毒、寄生虫 |
500左右 |
|
遗传 |
/ |
|
2014 |
大鼠、小鼠、豚鼠、兔、沙鼠、猴、犬 |
细菌、病毒、寄生虫 |
500左右 |
|
遗传 |
/ |
|
2015 |
大鼠、小鼠、豚鼠、兔、沙鼠、猴、犬 |
细菌、病毒、寄生虫 |
500左右 |
|
遗传 |
/ |
1.2实验动物环境检测情况(2011-2015年)
平均每年检测40家环境(含IVC),约1/3为生产单位,2/3为使用单位,检测项目为环境13项,发出的报告年均40份,检测中不合格项各种指标均有发现,其中压差、换气次数、温湿度、照度、噪声等均有出现。
2、其他检测服务
提供试剂盒情况,见表5。
表5 实验动物检测试剂盒(2011年-2015年)
时间 |
提供试剂盒情况 |
||
多少省市、多少单位 |
种类 |
数量(盒) |
|
2011 |
11个单位 |
RHDV |
14盒 |
2012 |
/ |
/ |
/ |
2013 |
/ |
/ |
/ |
2014 |
/ |
/ |
/ |
2015 |
/ |
/ |
/ |
3、研究工作情况
2011-2015年,承担的科研项目(国家和省级),见表6。
表6 承担的项目/课题工作(2011-2015年)
序号 |
项目/课题名称 |
1 |
实验动物汉坦病毒快速检测与基因分型技术的研究,主持 |
2 |
浙江省实验动物现状及提高质量加强监管对策研究,主持 |
3 |
实验动物源性烈性传染病、人畜共患病病原体快速诊断体系及突发重大疫情应急响应体系建设,主持 |
4 |
实验小鼠鼠痘病毒感染的鉴别诊断技术及其示范,主持 |
5 |
转基因小鼠的检疫体系建设,主持 |
6 |
间接ELISA法检测实验动物血清抗弓形虫特异性抗体的试剂盒研制,主持 |
7 |
清洁级长爪沙鼠种群和资源保存基地的建立,主持 |
8 |
长爪沙鼠TLR3、TLR4基因结构与信号通路特征及其在病原易感中的机制,主持 |
9 |
实验动物质量监测体系的完善与检测关键技术研究(总项目)---快检和鉴别诊断技术及质控品研究(子课题),主持 |
10 |
一种新型隔离器系统的研制与初步应用,主持 |
11 |
PCR直接测序法对汉坦病毒进行基因分型的引物及试剂盒和方法,主持 |
12 |
实验动物烈性传染病、人畜共患病病原体高通量鉴别诊断芯片的研发,主持 |
13 |
实验动物重大疾病突发应急事件中快速诊断技术的建立及应用研究,主持 |
4、发表论文和专著情况
4.1发表论文
中国实验动物学报,中国比较医学杂志,实验动物与比较医学,实验动物科学上发表35篇,主要涉及动物质量控制(传染病诊断),检测试剂研究开发,动物资源开发与遗传育种。
4.2发表专著(2011-2015年)
2011-2015年发表专著情况具体见表7。
表7 2011-2015发表专著情况
专著名称 |
主编 |
出版社和时间 |
感染微生态学书(第四十二章无菌-悉生动物模型的制备与应用) |
李兰娟等 |
人民卫生出版社/2012.10.第2版,711-724 |
5、获奖情况
2011-2015年获奖情况具体见表8。
表8 2011-2015年获奖情况
获奖题目 |
获奖等级 |
获奖名称 |
兔出血症病毒致病机理及诊断方法的研 |
三等 |
2011年度浙江省科学技术奖 省级实验动物科技计划项目优秀成果奖 |
Z:ZCLA长爪沙鼠生物净化前后微生物携带情况的比较研究 |
优秀奖 |
第十二届华东地区实验动物科学学术交流会优秀论文 |
浙江省实验动物管理立法前期研究 |
二等奖 |
浙江省医药卫生科技奖 |
高脂血症长爪沙鼠模型的转录组检测和代谢性炎症通路的初步研究 |
协和奖 |
第11届中国实验动物科学年会优秀论文奖 |
大鼠肠内容物细菌基因组DNA提取方法的比较 |
优秀奖 |
浙江省实验动物科技计划项目优秀论文 |
6、专利等
(1)长爪沙鼠原代肝细胞的培养方法,ZL201210437161.8;
(2)一种高脂饲料及在构建非酒精性脂肪肝动物模型中的应用,201110008891.1;
(3)一种长爪沙鼠生物净化的方法,201210288188.5;
(4)PCR直接测序法对汉坦病毒进行基因分型的引物及试剂盒和方法,201310413527.5
(5)一种检测鼠痘病毒的荧光定量PCR方法及其专用引物对、探针和试剂盒,201410734124.2
(6)一种用于检测沙门氏菌的试剂盒及其检测方法,201510248700.7
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