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饲养管理

实验动物选择时应注意的问题

2016年03月31日 浏览量: 评论(0) 来源:网络 作者:网络 责任编辑:wlladmin
摘要:实验动物选择时应注意的问题

(一)年龄、体重

不同品种和品系的实验动物其寿命各不同,分别会以日、月、年为单位来计算。如果对狗和小鼠均观察一年,所反映的发育过程是不同的,即使同样是狗,不同的年龄阶段所得的实验数据也不尽相同。所以选用实验动物时,应注意到实验动物之间、实验动物与人之间的年龄对应,以便进行分析和比较。图8—1所示为各种动物平均寿命的相应时期,表8—2是大鼠与人的年龄对应表,表8—3是狗与人的年龄对应表。

         图8一1各种动物平均寿命的相应时期

表8—2大鼠与人的年龄对应

    大鼠的月龄/月

    大鼠的年龄/年

  大鼠对应的人的年龄/年

    1.5

    0.125

    12.5

    6

    0.5

    18

    12

    1

    30

    18

    1.5

    45

    24

    2

    60

    30

    2.5

    75

    36

    3

    90

    42

    3.5

    105

    45

    3.75

    113

    48

    4

    120

 

表8—3狗与人的年龄对应

  种别

    年龄对应/年

    狗

  l

  2

  3

  4

  5

  6

  7

  8

  9

 lO

11

 12

 13

 14

 1 5

 16

    人

    15

    24

    28

    34

    40

    42

    44

    48

    52

    56

    60

    64

    68

    72

    76

    80

动物的体重与年龄有一定的关系,可按体重推算年龄,例如昆明小鼠6周龄时雄性约32g,雌性约28g;wistar大鼠6周龄时雄性为l80g,雌性约l60g,豚鼠2月龄体重约400g,日本大耳白兔8月龄时体重约4500g。应注意的是,动物体重除与年龄密切相关外,还与品种、品系、营养状态、饲养管理等因素有关,不宜笼统对待。

同一实验中,动物体重要尽可能一致,若相差悬殊,则易增加动物反应的个体差异,影响实验结果的准确性。

(二)性别

实验动物对药物的毒性反应有性别差异,并主要表现在成年动物。一般而言,雌性动物对药物的敏感性高于雄性,例如雌性小鼠对四氧嘧啶、叶酸和新胂凡纳明等药物的敏感性高于雄性小鼠,但雄性小鼠对乙醇、氨基比林、氯仿、麦角固醇和烟碱等药物的敏感性则明显高于雌性小鼠,例大鼠皮下注射0.1~0.2mL的30%乙醇溶液,雄性动物的死亡率为84%,而雌性动物的死亡率为30%。麦角新碱在5~6周龄雄性大鼠可见镇痛效果,但在雌性大鼠则不出现镇痛作用。表8~4例举了实验动物对药物敏感件的性别差异。

表8—4实验动物药物敏感性的性别差异

    药名

 动物种类

较敏感性别

    药名

 动物种类

 较敏感性别

   肾上腺素

    大鼠

    雄

    铅

    大鼠

    雄

    乙醇

    小鼠

    雄

 二硝基苯酚

    猫

    雌

   野百合碱

    大鼠

    雄

 固醇类激素

    大鼠

    雌

   四氧嘧啶

    小鼠

    雄

   麦角固醇

    小鼠

    雄

   氨基比林

    小鼠

    雄

    士的宁

    大鼠

    雌

   氨基蝶呤

    小鼠

    雄

    麦角

    大鼠

    雄

巴比妥酸盐类

  大鼠

    雌

    碘胺

    大鼠

    雌

    苯

    家兔

    雌

 乙基硫氨酸

    大鼠

    雌

    四氧化碳

    大鼠

    雌

    乙苯基

    大鼠

    雌

  印防已毒素

    大鼠

    雌

    哇巴因

    大鼠

    雄

    钾

    大鼠

    雄

 新胂凡纳明

    小鼠

    雌

    氯仿

    小鼠

    雄

    烟碱

    小鼠

    雄

    地高辛

    犬

    雄

    海葱

    大鼠

    雌

    硒

    大鼠

    雌

    叶酸

    小鼠

    雌

 

 一般认为,动物对激素的依存性,是其药物毒性反应性别差异的主要原因。研究发现小鼠对氨基比林、氯仿;大鼠对巴比妥类、野百合碱、印防己毒素和海葱;犬对地高辛等的毒性反应的性别差异,都与性激素有关。在医学科学研究中,通常选择实验动物应雌雄各半。若发现有明显的性别差异时,则应分别测定不同性别实验动物的 LD50值。

(三)生理状况

动物如果怀孕、哺乳等对实验结果影响很大,因此实验不宜采用处于特殊生理状态下的动物。如在实验过程中发现动物怀孕,则体重及某些生理生化指标均会受到严重影响,有时应将怀孕动物剔除。动物处于换毛季节(如鸡换羽,兔换毛)时,免疫功能会低下。

(四)健康状况

动物健康状况对实验结果正确与否有直接的影响。患病动物对药物的耐受性较健康动物小,因而患病动物容易在实验过程中中毒死亡。患病或营养不良的家兔不易复制出动脉粥样硬化模型。犬食量不足,体重下降l0%~20%后,麻醉时间显著延长,甚至会因饥饿、创伤等原因导致休克。为确保实验动物健康,要做好实验前的动物健康检查工作。首先饲养观察7~14天,实验开始时再对每一只动物进行如下主要项目的健康检查:

(1)眼睛:瞳孔是否清晰,眼睛有无分泌物,眼睑有无发炎。    

(2)耳:耳道是否有分泌物溢出;耳廓里有无脓疮、血痂。    

(3)鼻:有无喷嚏以及浆性粘液分泌物流出。

(4)皮肤:有无创伤,脓疡、疥癣、湿疹。

(5)头部:姿势是否端正(若有歪斜,常证明有内耳疾患)。    

(6)胃肠道:有无呕吐、腹泻、便秘、肛门口被毛是否洁净。    

(7)神经系统:是否有震颤、不全性麻痹等。

对于疾病的确诊,应做病原学检查。但一般性实验,特别是用小动物做的急性实验,难以做到,也没多大必要,因此,对于实验动物疾病,原则上只作预防,不作治疗。但对于一些珍贵的动物,发现异常表现时,应确诊其疾病,并采取相应的防治措施。

(五)微生物等级

按微生物学控制分类,国外将实验动物分成四级,即普通动物、无特定病原体动物、悉生动物(已知菌动物)及无菌动物。

根据我国实际情况,国家科委将实验动物分为普通动物、清洁动物、无特定病原体动物和无菌动物(包括悉生动物)四个级别。各级动物具有不同的特点,分别适用不同的研究目的。无菌动物(GF)是一种超常生态模型,即能排除微生物对背景的干扰,亦减少了免疫功能的影响;无特殊病原体动物(SPF)是正常的健康无病模型,应用这类动物,能排除疾病或病原的背景性干扰;普通动物具有价廉、易获得、饲养设施简便、容易管理等特点,但选用时应考虑微生物对实验结果的影响。根据各级实验动物特点,其在实验中的优缺点总结于表8—5。

表8—5无菌动物、无特殊病原体动物和普通动物特点比较

    实验项目

    无菌动物

  无特殊病原体动物

    普通动物

    传染病

    无

    无

    有或可能有

    寄生虫

    无

    无

    有或可能有

    实验结果

    明确

    明确

    有疑问

    应用动物数

    少数

    少数

    多(或大量)

    统计价值

    好

    可能好

    不准确

    长期实验

    可能好

    可能好

    困难

    自然死亡率

    很低

    低

    高

    长期实验存活率

    约100%

    约90%

    约40%

    实验的准确设计

    可能

    可能

    不可能

实验结果的讨论价值

    很高

    高

    低

(六)遗传背景

尽量选用遗传背景明确的品系动物,而不选用随意交配繁殖的杂种动物。采用遗传学控制方法培育出来的近交系动物、突变系动物、杂交系动物存在遗传均质性,反应一致性好,因而实验结果精确可靠,广泛用于各科研领域。封闭群动物在遗传控制方面虽比未经封闭饲养的一般动物严格,具有群体的遗传特征,但是动物之间存在个体差异。因此,其反应的一致性不如近交系动物。

 各种近交系动物均具有独特的性质,要根据不同的需要进行选择。并非随意选择一个近交系就比非近交系动物好。因同种动物的不同近交系之间,亦可能在某些特性上存在很大差异。从某种意义上讲,如果选用不当,可能得不出正确的实验结论。不同品系的小鼠对同一刺激的反应差异很大,在选用时应充分注意。如C57BL小鼠对肾上腺皮质激素的敏感性比DBA及BALB/c小鼠高12倍;DBA小鼠闻电铃声音刺激后可出现明显的癫痫症状,甚至死亡,而C57BL小鼠则根本不出现此反应; DBA/2及C3H小鼠对同一种病毒(Newcastle病毒)的反应和DBA/1小鼠则完全不同,前者引起肺炎而后者引起脑炎;A、TA2、C3H小鼠易致癌,C57、C58、TA1等品系不易致癌;AKR、DBA/2、615等品系易致白血病;C3H雌鼠乳腺癌自发率达90%等。

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