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RNA提取方法及步骤
2015年09月07日
来源:生物帮
作者:生物帮
责任编辑:wlladmin
2.2.1 样品处理:
(1) 培养细胞:收获细胞1-5×107,移入1.5ml离心管中,加入1ml Trizol,混匀,室温静置5min。
(2) 组织:取50-100mg组织(新鲜或-70℃及液氮中保存的组织均可)置1.5ml离心管中,加入1ml Trizol充分匀浆,室温静置5min。
2.2.2 提取步骤:
(1) 加入0.2ml氯仿,振荡15s,静置2min。
(2) 4℃离心,12000g×15min,取上清。
(3) 加入0.5ml异丙醇,将管中液体轻轻混匀,室温静置10min。
(4) 4℃离心,12000g×10min,弃上清。
(5) 加入1ml 75%乙醇,轻轻洗涤沉淀。4℃,7500g×5min,弃上清。
(6) 晾干,加入适量的DEPC H2O溶解(65℃促溶10-15min)。
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